環(huán)保型病理GS染色套液與傳統(tǒng)HE染液的比較

環(huán)保型病理GS染色套液與傳統(tǒng)HE染液的比較

郭寶強(qiáng)  竇文聰  郭影芳  張星  吳彤輝

河南臨潁縣人民醫(yī)院

摘自：2013年《臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志》

采用甲醛固定、乙醇脫水、二甲苯透明、石蠟包埋制作技術(shù)和蘇木精染色技術(shù)是經(jīng)典的病理制片技術(shù)，但其中標(biāo)本中含有的甲醛、二甲苯、氧化汞等有毒有害化學(xué)試劑，對(duì)技術(shù)人 員和工作環(huán)境的毒害及污染嚴(yán)重，且使用后廢棄的試劑對(duì)環(huán)境亦造成嚴(yán)重污染。隨著人們對(duì)環(huán)境保護(hù)意識(shí)的提高，病理工作者在積極努力尋找一種******、無害的環(huán)保型試劑，盡量減少危害。我們對(duì)哈爾濱格林公司生產(chǎn)的環(huán)保型GS套裝染液試劑與傳統(tǒng)含有二甲苯、氧化汞的HE染液進(jìn)行制片進(jìn)行對(duì)比，以探討環(huán)保型GS套裝染液試劑的性能。

1. 材料與方法

 1.1材料

選取臨穎縣人民醫(yī)院病理科2013年活檢及手術(shù)切除的220例蠟塊標(biāo)本，包擴(kuò)食管、胃、腸、膽囊、闌尾、甲狀腺、子宮組織。

 1.2 試劑

（1)環(huán)保型GS染色制片套液購自哈爾濱格林公司。（2)傳統(tǒng)市售化學(xué)試劑、甲醛、二甲苯、乙醇、石蠟、含有氧化汞的HE染液。

 1.3 儀器

Leica2016切片機(jī)，HBTK包埋專用冷凍臺(tái)，TKY-TP攤片機(jī)，TKY-KPA烤片機(jī)。

 1.4 方法

每個(gè)組織蠟塊4 pm厚連續(xù)切片，將其隨機(jī)分成 A、B兩組進(jìn)行制片，切片放置75 T：烤片機(jī)中烤10 min。A 組按gs無汞染色套液流程進(jìn)行：脫蠟液i 一脫蠟液n—脫 蠟液m—無水乙醇I 一無水乙醇n—95%乙醇一水洗一無 汞HE染液一水洗一1%鹽酸分化一水洗一藍(lán)化液一水洗一 伊紅一無水乙醇i一無水乙醇n —除水透明液一透明液一 專用封片膠。B組按照傳統(tǒng)HE染色流程進(jìn)行：二甲苯I 一 二甲苯n+二甲苯m—無水乙醇i 一無水乙醇叮一95%乙 醇一80%乙醇一水洗一HE染液一水洗一 1%鹽酸分化一藍(lán) 化液一水洗一伊紅一80%乙醇一95%乙醇一無水乙醇I 一 無水乙醇n —二甲苯i一二甲苯n —中性樹膠封固。

2. 結(jié)果

鏡下對(duì)比觀察:使用環(huán)保型GS套裝染液染色的切片，細(xì)胞核無收縮，核染色清晰，核仁清晰可見；HE染色切片顏色鮮明，整體色彩鮮艷，著色均勻，胞質(zhì)染色適中，組織結(jié)構(gòu)清晰。通過對(duì)比A、B兩組染色都能夠保持良好的組織形態(tài)結(jié)構(gòu)，未發(fā)現(xiàn)組織和細(xì)胞有收縮或腫脹。A組切片染色色彩 更鮮艷、細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰、核質(zhì)對(duì)比更分明（圖1、2)， B組組織結(jié)構(gòu)清晰，細(xì)胞染色尚可（圖3、4)。

圖1胃黏膜組織慢性炎伴有腸化細(xì)胞，核胞質(zhì)對(duì)比更清晰，GS染色

圖2子宮平滑肌瘤，切片色彩更鮮艷，細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰，GS染色

圖3胃黏膜組織慢性炎伴有腸化細(xì)胞，組織結(jié)構(gòu)清晰，傳統(tǒng)HE染色

圖4子宮平滑肌瘤，細(xì)胞染色尚可，傳統(tǒng)HE染色

3. 討論

新型環(huán)保試劑GS套裝染色液不含二甲苯、氧化汞、甲醛等有害物質(zhì)，******、無色、無刺激性，對(duì)組織親和力強(qiáng)，染色速度快，不易產(chǎn)生氧化膜而污染組織。切片長期存放細(xì)胞核 不易褪色，染液使用時(shí)間長。鏡下見組織切片色彩鮮艷，細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰，核質(zhì)對(duì)比分明，與傳統(tǒng)HE染色效果相比，更能夠保持良好的組織形態(tài)結(jié)構(gòu)。經(jīng)對(duì)比試驗(yàn)，作者認(rèn)為GS套液制片效果優(yōu)于傳統(tǒng)試劑，是一種完全可以替代含有二甲苯等傳統(tǒng)試劑作為常規(guī)病理制片脫蠟、透明、染色的替代品， 其在以下幾方面具有明顯的優(yōu)勢(shì)。

 3.1科學(xué)環(huán)保、危害小

石蠟切片HE染色是當(dāng)前醫(yī)院病理科進(jìn)行病理診斷的常用技術(shù)。傳統(tǒng)染色過程中，二甲苯被病理實(shí)驗(yàn)室大量使用，其極易揮發(fā)，是一種對(duì)人體具有較強(qiáng)毒害作用的有機(jī)化學(xué)試劑，長期使用會(huì)使人頭暈、******、肢體震顫、*********下降等癥狀。除對(duì)病理工作者的健康構(gòu)成威脅外，如將廢棄的二甲苯倒入下水道，造成更大范圍的城市水系環(huán)境污染。格林GS套液試劑，使用過程中無明顯刺激性氣味，不含二甲苯等有毒物質(zhì)，避免工作人員在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)接觸大量揮發(fā)的二甲苯引起的工作環(huán)境毒害。

 3.2省時(shí)省力、效率高

格林GS套液試劑室溫下，3 x5 min，即可以對(duì)組織切片進(jìn)行良好的脫蠟，且脫蠟、透明只需5 缸，染色流程時(shí)間短，可減少大量的時(shí)間消耗，提高工作效率。

 3.3低碳減排、省試劑

格林GS套液試劑減少到14缸，減少試劑與原材料的消耗，同時(shí)降低廢棄物對(duì)環(huán)境的污染，達(dá)到低碳、減排、降低消耗的效果。

 3.4染液程序、標(biāo)準(zhǔn)化

每個(gè)醫(yī)院不同科室各自的染液標(biāo)準(zhǔn)很難統(tǒng)即使同一科室，不同人員配置的試劑、處理方法也有不同。嚴(yán)重阻礙了病理技術(shù)的程序化、標(biāo)準(zhǔn)化，使質(zhì)量控制很難達(dá)到統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。格林GS套液試劑，解決了質(zhì)量控制的標(biāo)準(zhǔn)化問題，推動(dòng)病理技術(shù)的標(biāo)準(zhǔn)化。

綜上所述，格林GS套液試劑達(dá)到了病理診斷所需的標(biāo)準(zhǔn)，并且實(shí)現(xiàn)了******環(huán)保化，能夠減少工作人員及環(huán)境的傷害和污染，具有創(chuàng)新、健康、環(huán)保、優(yōu)質(zhì)、******優(yōu)點(diǎn)的高科技產(chǎn)品，為建立“綠色實(shí)驗(yàn)室”奠定良好基礎(chǔ)，未來的病理實(shí)驗(yàn)室將逐步成為環(huán)保型的實(shí)驗(yàn)室。讓病理學(xué)工作者遠(yuǎn)離有害化學(xué)物質(zhì)、安全工作，意義重大，該染液值得廣泛推廣。

 

參考文獻(xiàn)

[1] Buesa R J. Histology safety: now and then J . Ann Diag Pathol，2007，11 (5) ：334 -9.

[2] Dapson R W. Glyoxal fixation ： how it wotks and why it only occa-sionally needs antigen retrieval［J] . Biotech Histochem， 2007， 82 (3) ： 161 -6.

[3] Buesa R J. Histology without formalin［J] . Ann Diagn Pathol，2008，12(6) :387 -96.

[4] 高蓉梅，彭鳳翔，李永春.TO型生物制片透明劑取代二甲苯在 病理制片中的應(yīng)用[J].診斷病理學(xué)雜志，2009，12(2) :147.

[5] 趙寶忠.蘇木色素染液傳統(tǒng)組方的比較分析[J].臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志，2013，29(1) :99 -101.

下載地址：

添加時(shí)間：2016-04-07 點(diǎn)擊量：1447